161
Plazmidlar
Bular bakteriya hujayralaridagi
halqasimon DNK boiib, genetik
materiallarning bir qismini tashkil qilsalar ham, biologik ahamiyati kattadir.
Ular baktenyalarmng har xil toksik moddalarga rezistentligini,
jumladan,
antibiotiklarga chidamli yoki chidamsizligini, ozuqa moddalami o‘zlashtirish
qobiliyatini ham belgilaydi. Bakteriya hujayralaridagi plazmidlar soni bittadan
yuztagacha bo‘lib, ularning replikatsivasi xromosomalarga bog'liq bo‘lmay,
avtonom holda kechadi. Piazmidlar xromosomalarga nisbatan turg‘un bo‘lmay,
genetik axborotlarni mobil (yengil, tez o‘tkazuvchi, tashuvchi) holda
saqlovchidir. Hujayralarda genlarning konyugatsiyasi faqat piazmidlar orqali
amalga oshadi.
Ular deyarli barcha bakteriyalarda mavjuddirlar. Plazmidalarning
ba’zilari o‘zlarining boshqa hujayraga o‘tkazilishi
haqidagi axborotni
saqlaydilar (F-plazmidalar), boshqalarida antibiotiklarga chidamli genlar (R-
plazmidalar) yoki g‘alati metabolitlarning utillanishiga ma’sul
genlar
yig'indisi joylashgandir (degradatsiya plazmidalari). Ma’lum funksi yalarni
bajaradigan genlar tutuvchi aniqlanmagan plazmidalar (kritik plazmidalar)
ham borligi ko‘rsatilgan. Plazmidalarning kattaligi 1 ming juft nukleotidlardan
kamroq 500 ming juft nukleotidlardan ko'proq oralig‘idadir. Har bir
plazmidada replikatsiya boshlanilish sayti joylashgan (ori), bu saytsiz
plazmida xo'jayin hujayrasida replikatsiyaga kirishmaydi. Hujayrada ba’zi
plazmidalar 10-100 nushalar bilan ifodalangan. Kam nushali (1-4) plazmidalar
ham hujayralarda uchrab turadi. Plazmida
DNKsi odatda umumiy hujayra
DNKsini 0,1-5,0% tashkil etadi.
Avtonom ravishda replikatsiyalanuvchi genetik elementlar sifatida
plazmidalar
klonirlangan
DNKni
o'tkazishga
mo‘ljallangan
asosiy
xususiyatlarga egalar. Ammo, ko‘pincha tabiiy, (modifikatsiyalanmagan)
plazmidalar “yuqori sifatli,” vektorlarga xos bo‘igan ba’zi xususiyatlardan
mahrumlar. Bunday muhim xususiyatlarga quydagilar kiradi:
162
1. Plazmidani kichik hajmi. Ekzogen DNKni
E.coliga o‘tishining
samaradorligi, plazmidani kattaligi 15 m.j.n.dan. ko‘p bo‘lsa pasa yadi.
2. Plazmidada unikal restriktsiya sayti mavjud bo‘lishi kerak, unga
donor DNKsini o‘tkazish mumkin.
3.
Rekornbinant
DNK
tutuvchi
retsipiyent
hujayralarning
identifikatsiyalash uchun plazmidada bir va undan
ortiq selektiv genetik
markerlar mavjud bo‘lishi kerak.
Yuqorida keltirilgan xususiyatlarga ega bo‘lgan plazmida vektorlari gen
injenerligi yo‘li bilan yaratiladi.
Plazmidlarning molekulalari ma’lum modifikatsiya qilingandan so‘ng,
vektor sifatida foydalaniladi. Avval uni halqa holatiga to‘g‘ri yo‘naltirilgan
restriktazalar orqali keltiriladi. Hosil bo'lgan DNKning oxiri to‘mtoq holda
bo'ladi. Tekis plazmidali DNK to‘mtoq tomoni oxirida maxsus
oligonukleotidlar
hosil qilinadi, ulami linkyorlar yoki yopishqoq tomonli
linkyorlarga fermentlar yordamida DNK bog'lanadi.
Hosil qilingan vektor va unga bog‘langan kDNK hujayra genomiga
kirgiziladi.
Kirgizilgan
begona
DNK
hujayra
genomini
o'zgartirib,
transformirlangan holatga keltiradi.
Bu hujayralar maqsadga asosan
seleksiyalanishi yoki klonlanishi mumkin. Hozirgi
kunda vektorlaming ikki
xili ma’lum bo'lib, ular oddiy va maxsus turlarga bo‘linadi. Oddiy velctorlar
klonlanganda ko‘p miqdordagi genlardir, maqsadlilarini ajratib, genlar
“kutubxonasi” ni yaratish mumkin.
Maxsus vektorlar esa genlarning ekspressiyasiga aloqador bo‘ladi.
Oddiy vektorlar har xil hujayralardagi genlarni ajratish va ularni o‘rganish
uchun ishlatilsa, maxsus vektorlar biotexnologiya maqsadlarda, genlarning
ekspressiyasini va maqsadli mahsulotlami ko‘p
miqdorda sintezlashda
qo'llanadi. Aynan shu maqsadda maqsadli oqsilni sintezlovchi genni hujayra
xromosomasiga joylab, promotor bilan bog‘lanadi.
Dostları ilə paylaş: