Cresterea ciupercilor - Pe calea cea simpla
Cultivarea ciupercilor in regim casnic
cu ajutorul perhidrolului
Volumul II
R. Rush Wayne, Ph.D.
Cresterea ciupercilor - Pe calea cea simpla
Cresterea ciupercilor in regim casnic cu ajutorul perhidrolului
Volumul II
Copyright © 2001
R. Rush Wayne. Ph.D.
Toate drepturile rezervate. Nici o parte a acestei lucrari nu poate fi
reprodusa sau folosita sub nici o forma fara permisiunea autorului acesteia..
Volumul I publicat sub titlul Cresterea ciupercilor prin metoda perhidrolului,
Decembrie 1996
Volumul II publicat pentru prima data in August 2000
Revizuit si adaugat, Iulie 2001
Visitati Web site-ul pentru informatii despre Cresterea ciupercilor - Pe calea cea simpla
http://www.mycomasters.com/Updates.html
precum si pentru ultimele si periodicele informatii noi despre metoda perhidrol.
CUPRINS
Introducere
Obtinerea, Depozitarea si Pastrarea culturilor de ciuperci
Utilizarea eprubetei in loc de vasul Petri
Dezavantajele vaselor Petri
Avantajele si dezavantajele folosirii eprubetei
Prepararea eprubetelor cu perhidrol
Efectuarea transferului in si din eprubeta
Curatarea miceliului din eprubeta
Mediul Bazat pe Bere (MBB)
Pornind de la Spori
Avantajele si dezavantajele pentru cazul in care porniti de la spori
Revizuire a metodei sporilor in perhidrol
Colectarea Sporilor
Germinarea Sporilor prin Metoda Disc
Alte idei de obtinere a miceliului fara agar
De ce sa cautati un inlocuitor pentru agar
Cum sa preparati discurile
Efectuarea transferurilor
Curatarea miceliului
Pastrarea culturilor fara agar
Expedierea culturilor prin posta
Re-sterilizarea cu ajutorul perhidrolului a vaselor Petri disponibilizate
Prepararea miceliului
Miceliu in pungi de plastic – “Miceliu in 8 minute”
Avantajele si dezavantajele folosirii pungilor de plastic
Producerea miceliului
Folosirea miceliului
Miceliu pe substrat "In 10 Minute"
Inocularea substratului din paie fara a folosi miceliu
Cum sa preparati si sa inoculati
Note legate de procedura folosita
Probleme care pot aparea
Prepararea Compostului
Compostul I: Prepararea paielor cu perhidrol – la temperatura camerei
Avantajele si dezavantajele perhidrolului cand folositi paie
Ce se intampla cu enzimele?
Procedura de preparare a paielor sau a altor tipuri de sustrat
Note la aceasta procedura
Compostul II: Prepararea talajului din lemn neuscat cu perhidrol
Compostul III: O metoda de “pune-si-amesteca” pentru substraturile compatibile cu perhidrolul
Ratiunile si avantajele metodei “pune-si-amesteca”
Cateva cuvinte despre rumegusul uscat in cuptoare
Procedura “pune-si-amesteca” la temperatura camerei
Suplimente naturale folosite in aceasta metoda
Cata apa trebuie sa folositi
Cat perhidrol trebuie sa utilizati
Note la procedura “pune-si-amesteca “
Concluzii
Despre Autor
Introducere
intoarcere la meniu
Am scris cel de-al doilea manual: “Cresterea ciupercilor - Pe calea cea simpla”, pe de-o parte pentru a completa scaparile si omisunile din primul volum si pe de alta parte, pentru a prezenta citeva idei noi de cultivare a ciupercilor care sa duca la reducerea timpului, a efortului si a banilor investiti.
La fel ca si in primul volum, majoritatea metodelor din acest volum, au fost initial concepute pentru utilizare pentru culturi la scara mica sau casnica. Dar doua noi metode de preparare a compostului descrise in acest volum au fost special concepute pentru cultivatorii care doresc sa lucreze la scara comerciala. Si aproape toate tehnicile prezentate in aici, s-ar putea dovedi cel putin folositoare in contextul unei productii la scara comerciala.
Procedurile din acest volum sunt organizate conform etapelor necesare in realizarea unei culturi de ciuperci. Astfel, prima data este prezentata pastrarea culturilor si a sporilor de germinare a culturiilor. Apoi urmeaza metodele de preparare a miceliului, incheindu-se cu procedurile de preparare a compostului.
Procedurile din acest volum presupun faptul ca sunteti familiarizat cu metodele folosirii perhidrolului ca element de pasteurizare. Daca nu ati mai folosit aceasta metoda, este indicat sa consultati primul volum din Cresterea ciupercilor - Pe calea cea simpla. Acesta contine informatii esentiale precum si notiuni generale de cultivare a ciupercilor, iar in particular informatiile necesare pentru utilizarea perhidrolului in cultivarea ciupercilor.
Metodele bazate pe utilizarea perhidrolului din acest volum, sunt inventii personale – pana in momentul in care alcineva v-a sustine contrariul. Metodele care nu se bazeaza pe metoda perhidrol au fost facute publice de catre cei care le-au dezvoltat. Le-am prezentat aici deoarece ele au o valoare certa pentru cultivatorii prin metoda perhidrol.
Destul cu povestile! La treaba!
Obtinerea, Depozitarea si Pastrarea culturilor de ciuperci
intoarcere la meniu
Utilizarea eprubetei in loc de vasul Petri
intoarcere la meniu
Este cunoscut faptul ca in procedura standard de dezvoltare a culturiilor de ciuperci se foloseste vasul Petri umplut cu un mediu de agar. Tinand cont ca nu toti cultivatori pot detine laboratoare sterile, acest standard trebuie pus sub semnul intrebarii. Probabil cel mai mare dezavantaj al vasului Petri este faptul ca are o suprafata asa mare de expunere. Datorita faptului ca acestea sunt folosite pentru pastrarea indelungata a culturii de ciupercii, probabilitatea de a fi contaminate din aer este foarte mare. Chiar si prin metoda perhidrol, ocazional pot aparea infestari care se vad pe marginea vasului Petri. Aceasta se intampla mai ales atunci cand miceliul s-a dezvoltat aproape pe toata suprafata agarului, si in mod special in perioadele de timp umede.
O solutie de rezolvare a problemelor este schimbarea vaselor cu unele care au o suprafata de expunere cat mai redusa. De exemplu, eprubetele cu capac sunt o alegere buna. Ma refer aici la eprubete care au dimensiunile aproximative de 19x125mm, care urmeaza a fi umplute partial cu agar topit si care este lasat sa se solidifice sub un anumit unghi.
Eprubetele sunt relativ usor de manevrat si de depozitat. Deasemenea este usor de tinut gatul eprubetei deasupra unei flacari de gaz in momentele in care aceasta urmeaza sa fie inchisa sau deschisa. Astfel obtinem asigurarea suplimentara impotriva contaminantilor. Apa din acestea se evapora mult mai greu decat cea din vasele Petri, astfel ca si concentratia de perhidrol ramane eficienta pe o durata mai lunga de timp. Chiar si fara perhidrol, rata de contaminare este redusa. In plus cantitatea de agar necesara in eprubete este mai mica decat cea din vasele Petri, aceasta ducand la economisirea de bani. Dar are si un dezavantaj. Unele ciuperci nu le place mediul umed din eprubeta (exemplu: H. ulmarius). Nu puteti sa monitorizati morfologia miceliului din eprubete asa cum o faceti in vasele Petri (modificarile morfologice pot indica eventuale contaminari sau alte probleme). Si poate fi extrem de dificil sa rupeti bucatele din miceliul aflat in eprubeta cand doriti sa inoculati alte culturi. Aceasta ultima problema depinde si de tipul de pat pe care il creaza miceliul ciupercii.
Prepararea eprubetelor
Aici aveti modul de obtinere a unui set de eprubete:
-
Masurati ingredientele conform retelei MDA (malt-drojdie-agar) si puneti-le intr-o cana curata de metal prevazuta cu gat de scurgere.(Mai jos aveti reteta MDA - din 250ml. o sa obtineti aproximativ 20 de eprubete.)
-
Puneti o folie de aluminiu ca si capac la cana. Puneti cana in vasul sub presiune in care se gaseste putina apa. Puneti si eprubetele cu capac in vasul sub presiune, de preferinta intr-un alt vas.
-
Fierbeti 10 minute fara capacul pus. Puneti capacul, si fierbeti la presiune maxima pentru inca 10 minute.
-
Indepartati imediat vasul sub presiune de pe aragaz si raciti-l. Dati-i jos capacul imediat ce presiunea a disparut. Scoateti cana si vasul cu eprubete pentru a se raci mai repede. Puteti pune cana intr-un vas cu apa rece pentru a grabi racirea, dar nu lasati ca solutia din el sa inceapa sa se solidifice.
-
Adaugati 1,5ml perhidrol la 250ml mediu MDA. Puneti perhidrolul cu ajutorul unei pipete pe care ati pasteurizat-o prin trecerea acesteia prin apa fierbinte. Amestecat perhidrolul prin rotirea canii.
-
In final puneti continutul in eprubete. Folositi-va de gatul de scurgere al canii pentru a evita varsarea pe gatul eprubetei. Intre degetul mic si cel inelar de la mana tineti capacul eprubetei.
-
Puneti capacul la fiecare eprubeta si dispuneti eprubetele pe un plan inclinat usor, pentru ca acestea sa se solidifice. In momentul in care acestea s-au solidificat, acestea sunt pregatite pentru utilizare.
Reteta MDA pe care o folosesc:
12 gr. Agar-agar
12 gr. pulbere de malt
1 gr. drojdie de bere uscata
0.5 gr. faina (prin rotatie grau, secara, porumb, orez, ovaz)
0.5 gr. hrana concentrat pentru iepuri (ori pentru alte animale)
4 gr. rumegus (cantitatea de rumegus poate fi crescuta pentru speciile care se dezvolta mai greu pe agar)
1 litru apa de la robinet
pentru ajustarea pH-ului intre 6 si 8 folositi otet de mere si bicarbonat de sodiu (optional)
Efectuarea transferului in si din eprubeta
Pentru inocularea eprubetei, si pentru extragerea miceliului din ea, este indicat sa aveti o ustensila rigida.Pentru confectionarea acesteia puteti folosi o sarma rigida careia ii faceti o bucla mica la unul din capete, celalat capat introduceti-l printr-un tub de sticla (3mm diametru). In final topiti sticla la capatul sirmei care nu are bucla pana cand aceasta se lipeste de sarma. Acest tub cu nucla de sarma formata devine ustensila dvs. de lucru.
Pentru succesul inocularii, va fi nevoie de o mica sapatura efectuata in continutul eprubetei pentru ruperea unei bucati de agar cu miceliu pe care il veti transfera in eprubetele noi. (daca bucatica este prea mica sau daca radeti doar miceliul de la suprafata agar-ului, s-ar putea ca acesta sa nu se dezvolte). Dar, daca de prima data nu reusiti, atunci puteti incerca in continuare cu aceeasi eprubeta. Perhidrolul o va mentine fara contaminanti. Imi place sa sap cu ustensila pe care am creat-o pentru a taia o bucatica de cultura. Dar este foarte dificil sa rupeti o bucatica de dimensiunea dorita. De multe ori am avut bucati care au cazut jos de pe ustensila in miscarea pe care o faceam pentru tranfer. Oricum in final veti reusi. Invartiti gura eprubetei in flacara sau lampa cu alcool inaintea desfacerii capacului si inainte de punerea acestuia la loc.
Curatarea miceliului din eprubeta
In Volumul I : Cresterea ciupercilor - Pe calea cea simpla, am explicat cum microbi invizibili pot sa contamineze si sa se dezvolte intr-o cultura tratata cu perhidrol. Tot acolo am prezentat si o metoda de “ curatare” a miceliului contaminat prin inocularea la fund a vasului Petri. In eprubeta, contaminarea se petrece intr-un ritm mai lent decat in vasele Petri. Dar s-ar putea ca acumularea acestora sa fie exact in locul in care miceliul trebuie curatat. Deoarece nu exista o procedura convenabila de inoculare a eprubetei la fundul acesteia, va trebui sa folosim alta metoda. Aceasta consta in turnarea unui al doilea strat de agar – cand acesta este suficient de racit, dar nesolidificat – peste miceliul care s-a dezvoltat peste primul strat. Astfel miceliul se dezvolta in ala doilea strat, autocuratandu-se pe masura ce se dezvolta.
Iata cum trebuie sa procedati:
Preparati si inoculati eprubetele asa cum am descris mai sus. Permiteti miceliului sa se dezvolte un pic peste agar.
-
Preparati o cantitate mica de MDA prin procedura standard. Folositi cana cu gat de scurgere. Acoperiti-o cu folie de aluminiu.
-
Dupa fierbere, cand s-a racit substanta, adaugati perhidrolul de concentratie uzuala. Amestecati prin rotirea usoara a canii.
-
In momentul in care fundul canii puteti sa-l tineti in mana aprindeti lama cu alcool. Deschideti o eprubeta tinand capacul pe degetul mic. Rotiti gura eprubetei peste flacara lampii cu alcool. Turnati agarul proaspat in eprubeta astfel incat sa acoperiti complet miceliul. Puteti sa faceti asta fie tinand inclinat eprubeta, fie tinand-o in pozitie verticala. Cu cat veti turna mai putin agar cu atat mai mica va fi distanta pe care miceliul o va strabate pana va ajunge la suprafata. Fiti atent: agarul din cana tinde sa se solidifice rapid! Tineti cana intr-un vas cu apa usor incalzita.
-
Puneti la loc capacul eprubetei.
-
Asteptati ca miceliul sa se dezvolte pe noul strat de agar.
Cand extrageti miceliul pentru inoculare, aveti grija sa nu patrundeti din stratul superior in cel inferior. Astfel veti anula functia celui de-al doilea strat.
Mediul Bazat pe Bere (MBB)
intoarcere la meniu
In continuare aveti o metoda pentru prepararea mediului de agar care va salveaza de la marea majoritate a cantaririlor si masuratorilor. De asemenea aceasta este perfecta pentru cei care nu pot sa gaseasca o sursa de extract de malt. Si chiar daca puteti obtine maltul, acesta se poate pietrifica in cazul in care il depozitati. Acest mediu rezolva aceasta problema. El provine prin bunavointa Dr. Nenad Vidovic si Sansin Corporation din Ontario, Canada (vezi Vidovic, N., Specialty Mushrooms--Small Scale Production, Mycelium, 25, 1999, pages 4 and 8). Dr. Vidovic a demonstrat ca cateva specii de ciuperci se pot dezvolta in mediul MBB la fel de bine ca si in mediul comercial de extract de malt. A modificat reteta lui pentru a include si perhidrolul.
Ingrediente:
1 parte bere proaspata
3 parti apa
2% agar din greutate (2 gr. pulbere de agar la 100ml.)
-
Amestecati berea cu apa.
-
Adaugati agar-ul.
-
Sterilizati intr-un vas de presiune (15atm.) dupa ce ati incalzit 10min. pentru ca agar-ul sa se dizolve.
-
Raciti pana cand puteti sa manevrati cu mana. Adaugati perhidrolul (6ml/l, 3%), amestecati bine si turnati mediul in vase Petri sterile.
Dr. Vidovic mentioneaza ca MBB fara agar este un mediu excelent de stocare. El numeste acest mediu MLBB (mediu lichid bazat pe bere). Ambele culturi de Oyster (Pleurotus ostreatus) si morels (speciile Morchella) s-au putut folosi si dupa doi ani de zile (fara adaos de perhidrol). De asemenea acest mediu este indicat pentru germinarea din spori.
Pornind de la Spori
intoarcere la meniu
Pornesc de la ideea ca toti cultivatorii doresc sa inceapa cu specii de ciuperci sanatoase. Aceasta se poate obtine de la furnizori de miceliu de ciuperci. Aceste culturi au fost testate si au dovedit ca au o productie de ciuperci buna in cazul in care se reproduc conditiile de crestere. Exceptand cazul in care in mod repetat cultura se deterioreaza, aceasta va produce cantitati de ciuperci insemnate in conditiile cerute de cultura. Si in cazul in care pierdeti cultura, puteti (in cele mai multe cazuri) sa obtineti miceliul de la acelasi furnizor. Astfel aceasta copie va produce ciupeci in aceleasi conditii pe care le-ati folosit si pana acum. Daca porniti de la spori, dimpotriva, nu aveti nici o asigurare asupra faptului ca veti obtine cantitatea de ciuperci normala din cultura de miceliu pe care ati dezvoltat-o. De asemenea nu aveti nici o asigurare ca ciupercile cultivate vor avea aceleasi caracteristici cu acelea a caror spori i-ati folosit. In plus, nu veti cunoaste conditiile optime de crestere a miceliului obtinut din spori pana cand nu veti efectua cateva testari. Si daca veti pierde cultura, nu veti avea de unde sa porniti din nou.
Totusi exista si pareri contrare. Culturi obtinute din germinarea sporilor sunt de cele mai multe ori mai viguroase. Cu specii care se dezvolta rapid ca Oyster, diferenta dintre ciuperca mama si ciuperca obtinuta din sporii acesteia este, de cele mai multe ori, mica. Sporii costa putin sau deloc, pe cand cand miceliul poate fi costisitor. Sporii pot fi obtinuti din ciuperci uscate pe cand miceliul nu. Si asa mai departe. In mod cert merita sa aveti o metoda simpla de germinare din spori.
In manualul I, am insistat asupra faptului ca sporii nu pot germina intr-un mediu cu perhidrol. Dar o seama de cultivatori mi-au scris ca au germinat spori in prezenta perhidrolului. Astfel ca acum pot sa spun da, se poate. Va trebui sa aplicati peste un milion de spori pe suprafata mediului cu perhidrol, dar aceasta se poate. Totusi nu sunt convins ca aceasta idee este una buna pentru cazul in care aceasta devine o rutina. Miceliul obtinut pe aceasta cale poate fi foarte usor modificat genetic. Si asa cum va fi dovedit, nu este foarte dificil sa incepeti o cultura incepand de la spori in absenta perhidrolului, chiar in spatii nesterilizate. O metoda buna este sa incepeti cu spori in eprubeta. Astfel sansele de contaminare prin aer este in mod substantial redusa comparativ cu vasele Petri.
Colectarea Sporilor
Iata o metoda de colectare a sporilor:
-
Sterilizati pentru 15min. vase Petri in oala sub presiune. Lasati-le sa se raceasca.
-
Luati o ciuperca matura pentru colectarea sporilor. Daca este posibil, alegeti una curata care sa nu fie acoperita cu spori.
-
Curatati o suprafata in incaperea in care urmeaza sa lucrati, in care sa nu existe multi curenti de aer si alte persoane. Curatati suprafata cu un burete, apoi stergeti-o cu alcool.
-
Deschideti unul din vasele Petri (capacul il puneti cu fata in sus pe suprafata curatata). Aranjati ciuperca deasupra vasului. Daca este suficient de mare ea va acoperi intreaga suprafata a vasului. Ciupercile mici precum cele Morels, pot fi suspendate deasupra vasului printr-un fir. Folositi-va imaginatia. Ideal este ca ciuperca sa nu atinga partea interioara sau fundul vasului Petri. Totodata, nu doriti ca interiorul vasului Petri sa fie expus contaminarilor din aer. Dar doriti ca ciupercile sa fie astfel dispuse incat sporii sa cada in vas.
-
Continuati sa colectati spori, ideal pana cand vedeti ca sporii apar ca un praf in vase. Aceasta duraza aproximativ o ora pentru ciupercile Oyster, care produc in mod copios spori. Dar veti avea nevoie de cateva ore pentru alte specii, si chiar si atunci nu veti observa sporii in vas. Inchideti vasul Petri cand ati terminat.
Germinarea Sporilor prin Metoda Disc
Aici aveti metoda mea preferata de germinare a sporilor. Ea nu foloseste nici agar nici perhidrol. O sa colectati sporii pe un disc mic de carton, apoi il veti introduce in eprubeta. Sporii vor germina in cateva picaturi de mediu nutritiv in eprubeta. Am folosit aceasta metoda cu succes pentru germinarea sporilor din shiitake, portabello, almond mushroom, elm oyster si Pleurotus. Iata cum veti proceda:
-
Executati cateva gauri la intamplare intr-o bucata de carton de culoare gri. Faceti aceasta cu ajutorul perforatorului de hartie.
-
Faceti aproximativ 10ml. de MLBB (fara agar)
-
Luati un set de eprubete cu capac.
-
In fiecare eprubeta puneti 5-10 picaturi de MLBB.
-
Sterilizati discurile de carton intr-un vas Petri sau intr-un vas cu capac (10min. la 15atm.).
-
In acelasi timp strilizati eprubetele care contin MLBB in ele. Eprubetele vor avea o cantitate mica de lichid pe fundul acestora dupa ce s-au racit.
-
Odata ce toate sunt sterilizate si racite, sterilizati in flacara o penseta. Utilizati-o pentru manevrarea discului de carton pe care colectati sporii (sau colectati sporii direct in vasul in care aveti discurile de carton).
-
Puneti fiecare disc pe care ati colectat spori in eprubetele sterile (utilizati flacara la gatul eprubetei cand deschideti si inchideti). Asigurati-va ca discul ajunge in mediul lichid de pe fundul eprubetei. Discul va trebui sa fie umed pentru ca sporii sa germineze. Insurubati capacul strans. Faceti cateva eprubete.
-
Va trebui sa va asigurati ca eprubetele nu se vor usca. Aceasta lucru este important pentru speciile care germineaza mai lent cum ar fi Shiitake sau Almond. Pentru aceste specii plasati eprubetele intr-un alt vas cu capac. In continuare adaugati un pic de apa in vas si puneti-i capacul.
-
Incubati. Schimbati apa din vasul cu capac in cazul in care aceasta s-a deteriorat.
-
Periodic examinati discurile din eprubete pentru a observa semnele de aparitie a miceliului. Scoateti eprubetele care au mucegait sau in care s-au dezvoltat bacterii. (mucegaiul de culoare verde sau albastru-verde va creste repede in gramezi. Acestea sunt albe la inceput, apoi urmeaza sa se coloreze la mijloc. Bacterile vor face ca lichidul sa se tulbure.)
-
Odata ce ati obtinut ceva miceliu mutati discul intr-un vas Petri sau o eprubeta tratata cu perhidrol. Puteti sa faceti aceasta folosindu-va de o penseta sterilizata.
-
Incubati si lasati ca miceliul sa se dezvolte. Cresterea va fi lenta, deoarece miceliul trebuie sa se adapteze la perhidrol.
Culoarea inchisa a discurilor de carton ajuta la punerea in evidenta a miceliului ce se dezvolta. Dar aveti grija ca miceliul uneori poate fi observat destul de greu.
Intr-un vas tratat cu perhidrol, puteti observa haloul format de miceliul care se imprastie in momentul in care creste. Miceliul poate sa nu fie omogen dispersat sau poate contine contaminanti. Daca este asa, haloul creat va avea portiuni cu cresteri deferite si cu infatisare diferita. Puteti lua miceliu din portiunile care arata cel mai bine si sa-l transferati in alte vase. Sectoarele de miceliu valabile au o crestere radiala sau de forma unui sarpe. Miceliul care arata ca bumbacul (vata) ar trebui evitat (aceasta forma este normala pentru unele specii). Odata ce ati obtinut miceliul in varianta corecta, fara sectoare, sunteti in masura sa cultivati miceliu si mai apoi sa-l utilizati in compost. Si nu uitati sa depozitati aceasta cultura!
Alte idei de obtinere a miceliului fara agar
intoarcere la meniu
Agarul este probabil cel mai costisitor ingredient folosit in cresterea ciupercilor. Este relativ usor sa-l utilizati odata ce v-ati obisnuit cu acesta. Dar multi dintre cei care doresc sa inceapa cultivarea ciupercilor ezita din cauza ca nu sunt familiarizati cu agarul. De aceea m-am gandit la cateva alternative. Aici sugerez o varianta simpla care da rezultate si care este o alternativa la agar – discurile gri de carton. Cortonul gri este ieftin si usor de gasit. (pot fi folosite si alte culori de carton). Atat timp cat acesta este curat, acesta nu va contine enzime care sa descompuna perhidrolul. Spre deosebire de cartonul presat cartonul gri se umezeste usor si materialul umed este suficient de usor de rupt in bucati pentru a fi transferat. Deasemenea este un substrat bun pentru dezvolaterea miceliului, oferind suportul pentru o crestere rapida chiar daca cantitatea de alti nutrienti este redusa. Si este un simplu fapt ca sa adaugati solutie nutritiva daca aceasta o considerati necesara.
Astfel, in loc sa treceti prin toate problemele in cazul folosirii agarului: masuratori si cantariri precise, dizolvarea si topirea agarului, racirea inceata, adaugarea perhidrolului, turnarea in vase, asteptarea pentru solidificarea acestuia, uscarea acestuia pe durata a mai multor zile, este mai usor sa taiati discuri de carton care sa se portiveasca in vasele Petri sau in borcane si sa preparati intr-un alt vas apa cu o solutie nutritiva. Apoi, fierbeti vasele sau borcanele in vasul sub presiune pentru 10 minute..Raciti rapid si adaugati perhidrolul. In final, inmuiati discul in solutia din vase pentru a avea protectia asigurata de perhidrol. Discurile de carton sunt pregatite sa fie utilizate imediat ce acestea s-au imbibat cu solutie.
Se pot folosi si cartoanele tiparite ca inlocuitor, dar acestea au cateva dezavantaje. Unul dintre ele este cazul in care acestea au o culoare deschisa, ca atare dezvoltarea miceliului este greu de observat. Dimensiunea miceliului poate avea marimea unui paianjen mic, care este foarte greu de reperat pe cartonul deschis la culoare. Ca sa complicam si mai mult, miceliul poate incepe sa se dezvolte in masa cartonului si mai putin la suprafata acestuia. In plus, de cele mai multe ori acesta nu se dezvolta intr-un halou frumos precum cel din mediul cu agar. Aparent dezvolatarea miceliului este influentata da variatiile si conditiile pe care acesta le intalneste in diferitele straturi ale cartonului.
Nu cunosc inca daca se poate face transferul direct doar pe cartoane, fara ca sa intram intr-o limitare a dezvoltarii din lipsa de nutrienti. In mod normal ma astept ca acest carton sa nu mai aiba nevoie de solutii nutritive suplimentare. Pana la urmatoarea notificare, este o buna idee sa adaugati solutie nutritiva pe discurile de carton, pentru a mentine dezvoltarea miceliului.
Dostları ilə paylaş: |