Gistologik tadqiqot usullari

Gistologik tadqiqot usullari.
Gistologiya - (yunoncha "gistos" - to'qima, logis - ta'lim) Bu ko'p hujayrali organizmlar va odamlar to'qimalarining tuzilishi, rivojlanishi va hayotiy faoliyati haqidagi fan. Ushbu fanning predmeti bo'lgan ob'ektlarni oddiy ko'z bilan ko'rish mumkin emas. Shuning uchun gistologiya tarixi eng kichik ob'ektlarni oddiy ko'z bilan o'rganish imkonini beradigan bunday asboblarning yaratilish tarixi bilan chambarchas bog'liq.
Gistologiya kursi shartli ravishda quyidagi bo'limlarga bo'linadi: n 1. Sitologiya - hujayra haqidagi fan. n 2. Embriologiya - organizmning paydo bo'lishidan to to'liq shakllanishigacha bo'lgan rivojlanish fanidir. n 3. Umumiy gistologiya - to'qimalarga xos bo'lgan umumiy qonuniyatlar haqidagi fan. n 4. Xususiy gistologiya - organlar va tizimlarning tuzilishi, rivojlanishini o'rganadi.
SITOLOGIYA - (yunoncha kós "hujayra" va lós - "o'rganish", "fan") n Biologiyaning tirik hujayralar, ularning organellalari, tuzilishi, faoliyati, hujayraning ko'payishi, qarishi va o'lishi jarayonlarini o'rganadigan bo'limi.
Hujayra nazariyasining yaratilish tarixi 1590 yil. Jansen mikroskopni ixtiro qildi, unda kattalashtirish ikkita linzaning ulanishi bilan ta'minlandi. 1665. Robert Guk birinchi marta hujayra atamasini ishlatgan. 1650-1700 yillar. Entoni van Levenguk birinchi marta bakteriyalar va boshqa mikroorganizmlarni tasvirlab bergan. 1700-1800 yillar. Turli to'qimalarning, asosan, sabzavotlarning ko'plab yangi tavsiflari va rasmlari nashr etilgan.
Asosiy tadqiqot usuli gistologiyada qo'llaniladigan biologik ob'ektlardir mikroskop, ya'ni mikroskop ostida gistologik preparatlarni o'rganish. Mikroskopiya mustaqil tadqiqot usuli bo'lishi mumkin, ammo so'nggi paytlarda u odatda boshqa usullar (gistokimyo, historradiografiya va boshqalar) bilan birlashtiriladi. Shuni esda tutish kerakki, mikroskop uchun turli xil mikroskop konstruktsiyalari qo'llaniladi, bu esa o'rganilayotgan ob'ektlarning turli parametrlarini o'rganish imkonini beradi. Quyidagilar mavjud mikroskop turlari:
yorug'lik mikroskopiyasi (ravshanligi 0,2 mkm) - mikroskopning eng keng tarqalgan turi;
ultrabinafsha mikroskopiya (ravshanligi 0,1 mkm);
ko'rib chiqilayotgan tuzilmalardagi kimyoviy moddalarni aniqlash uchun lyuminestsent (lyuminestsent) mikroskopiya;
bo'yalmagan gistologik preparatlardagi tuzilmalarni o'rganish uchun fazali kontrastli mikroskop;
asosan tolali tuzilmalarni o'rganish uchun polarizatsiya qiluvchi mikroskop;
tirik ob'ektlarni o'rganish uchun qorong'u maydon mikroskopiyasi;
qalin jismlarni o'rganish uchun yorug'lik nuri mikroskopiyasi;
elektron mikroskopiya (0,1-0,7 nm gacha ruxsat), uning ikki navi - transmissiya (uzatuvchi) elektron mikroskopiya va skanerlash yoki skanerlash mikroskopiyasi ultrastrukturalar yuzasining tasvirini beradi.
2. Gistologiyaning o'rganish ob'ektlari
3. Gistologik preparatlarni tayyorlash
4. Tadqiqot usullari
5. Gistologiya rivojlanishining tarixiy bosqichlari
1. Gistologiya hayvon organizmlari toʻqimalarining mikroskopik va submikroskopik tuzilishi, rivojlanishi va hayotiy faoliyati haqidagi fan. Binobarin, gistologiya tirik to`qima materiyasining tashkiliy darajalaridan birini o`rganadi. Quyidagilar mavjud ierarxik darajalar tirik materiyaning tashkil etilishi:
uyali;
to'qimalar;
organlarning strukturaviy va funktsional birliklari;
organ darajasi;
tizim darajasi;
organizm darajasi
Gistologiya akademik fan sifatida, quyidagi bo'limlarni o'z ichiga oladi: sitologiya, embriologiya, umumiy gistologiya (to'qimalarning tuzilishi va funktsiyalarini o'rganadi), xususiy gistologiya (organlarning mikroskopik tuzilishini o'rganadi).
asosiy ob'ekt gistologiyani o'rganish sog'lom odamning tanasidir va shuning uchun bu o'quv intizomi inson gistologiyasi deb ataladi.
Asosiy vazifa gistologiya hujayralar, to'qimalar, organlarning tuzilishini o'rganish, turli hodisalar o'rtasidagi aloqalarni o'rnatish, umumiy qonuniyatlarni o'rnatishdan iborat.
Gistologiya ham anatomiya kabi morfologik fanlarga kiradi, uning asosiy vazifasi tirik tizimlarning tuzilmalarini o'rganishdir. Anatomiyadan farqli o'laroq, gistologiya tirik materiyaning tuzilishini mikroskopik va elektron-mikroskopik darajada o'rganadi. Shu bilan birga, hozirgi vaqtda turli strukturaviy elementlarning tuzilishini o'rganish ular bajaradigan funktsiyalarni hisobga olgan holda amalga oshirilmoqda. Gistologiya, har qanday fan kabi, o'ziga xos xususiyatlarga ega ob'ektlar va usullar ularning o'qishi. To'g'ridan-to'g'ri o'rganish ob'ektlari - mikroskop ostida o'rganish uchun maxsus tayyorlangan hujayralar, to'qimalar va organlarning bo'laklari.
2. O'rganish ob'ektlari bo'linadi:
tirik (bir tomchi qondagi hujayralar, madaniyat hujayralari va boshqalar);
tirik organizmdan (biopsiya) ham, jasadlardan ham olinishi mumkin bo'lgan o'lik yoki qo'zg'almas.
Har qanday holatda, bo'laklarni olgandan so'ng, ular fiksativ eritmalar yoki muzlatish ta'siriga duchor bo'ladi. Ham ilmiy, ham ta'lim maqsadlarida qo'zg'almas ob'ektlardan foydalaniladi. Muayyan usulda tayyorlangan, mikroskop ostida tekshirish uchun ishlatiladigan preparatlar gistologik preparatlar deb ataladi.
Gistologik tayyorgarlik shaklida bo'lishi mumkin:
organ yoki to'qimalarning ingichka rangli qismi;
shisha ustiga surtish;
singan organdan shisha ustidagi iz;
yupqa plyonka tayyorlash.
Har qanday shakldagi gistologik preparat quyidagi talablarga javob berishi kerak:
tuzilmalarning hayotiy holatini saqlab qolish;
o'tadigan nurda mikroskop ostida o'rganish uchun etarlicha nozik va shaffof bo'lishi;
kontrastli bo'lish, ya'ni o'rganilayotgan tuzilmalar mikroskop ostida aniq belgilanishi kerak;
yorug'lik mikroskopiyasi uchun preparatlar uzoq vaqt davomida saqlanishi va qayta tekshirish uchun ishlatilishi kerak.
Ushbu talablarga preparatni tayyorlashda erishiladi.
3. Quyidagilar mavjud gistologik preparatni tayyorlash bosqichlari
Materialni olish(to'qima yoki organning bo'lagi) preparatni tayyorlash uchun. Bu quyidagi fikrlarni hisobga oladi: materialdan namuna olish hayvonning o'limidan yoki so'yilgandan so'ng va iloji bo'lsa, tirik ob'ektdan (biopsiya) imkon qadar tezroq amalga oshirilishi kerak, shunda hujayra, to'qima yoki tuzilmalarning tuzilmalari o'z ichiga oladi. organ yaxshiroq saqlanadi; bo'laklardan namuna olish to'qimalarga shikast etkazmaslik uchun o'tkir asbob bilan amalga oshirilishi kerak; bo'lakning qalinligi 5 mm dan oshmasligi kerak, shuning uchun mahkamlash eritmasi bo'lakning qalinligiga kirishi mumkin; parcha belgilanishi kerak (tananing nomi, hayvonning raqami yoki shaxsning ismi, namuna olingan sana va boshqalarni ko'rsating).
Bo'laklarni muhrlash vositalariga quyish(parafin, selloidin, qatronlar) yoki keyingi yupqa kesish uchun muzlatish.
Bo'limni tayyorlash maxsus pichoqlar yordamida maxsus qurilmalarda (mikrotom yoki ultramikrotom). Yorug'lik mikroskopi uchun bo'limlar shisha slaydlarga yopishtiriladi va elektron mikroskop uchun ular maxsus to'rlarga o'rnatiladi.
Ma'rifat bo'limi(ksilenda, toluolda), qatronlarda (balzam, polistirol) kapsülleme, qopqoq slipi.
Ushbu ketma-ket protseduralardan so'ng preparatni yorug'lik mikroskopi ostida o'rganish mumkin.
Elektron mikroskopiya maqsadlari uchun tayyorlash bosqichlarida ba'zi o'ziga xosliklar mavjud, ammo umumiy tamoyillar bir xil. Asosiy farq shundaki, yorug'lik mikroskopi uchun gistologik preparat uzoq vaqt davomida saqlanishi va qayta ishlatilishi mumkin. Elektron mikroskop uchun bo'laklar bir marta ishlatiladi. Shu bilan birga, preparatni qiziqtiradigan ob'ektlar birinchi navbatda suratga olinadi va tuzilmalarni o'rganish allaqachon elektron difraksiya naqshlari bo'yicha amalga oshiriladi.
Suyuq konsistensiyadagi to'qimalardan(qon, suyak iligi va boshqalar), preparatlar shisha slaydda smear shaklida tayyorlanadi, ular ham mahkamlanadi, bo'yaladi va keyin o'rganiladi.
Gistokimyoviy va sitokimyoviy usullar kimyoviy moddalar tarkibini va hatto ularning o'rganilayotgan tuzilmalardagi miqdorini aniqlash imkonini beradi. Usul ishlatiladigan reagent va substratdagi kimyoviy moddalar bilan kimyoviy reaktsiyalarni o'tkazishga asoslanadi, keyinchalik yorug'lik yoki lyuminestsent mikroskopiya bilan aniqlanadigan reaktsiya mahsuloti (kontrast yoki floresan) hosil bo'ladi.
Gistotoradiografiya usuli o‘rganilayotgan tuzilmalarga radioaktiv izotoplarni kiritish orqali tuzilmalardagi kimyoviy moddalar tarkibini va almashinish intensivligini aniqlash imkonini beradi. Usul ko'pincha hayvonlar tajribalarida qo'llaniladi.
Interferometriya usuli tirik yoki qoʻzgʻalmas jismlardagi moddalarning quruq massasini aniqlash imkonini beradi.
Immunomorfologik usullar antigen-antikor o'zaro ta'siriga asoslangan oldindan o'tkazilgan immun reaktsiyalaridan foydalangan holda, limfotsitlarning subpopulyatsiyasini aniqlash, hujayralarning begonalik darajasini aniqlash.