Taze olarak toplanmış infektif allantoik sıvı antibiyotiksiz steril PBS ile 1:10 dilüe edilir (allantoik sıvının HA titresinin 24’den (>1/16) daha büyük olması gerekmektedir. Eğer titresi düşük ise bir pasaj daha yapılmalıdır)
Dilüe edilmiş virüsun 0.05 ml’si, 0 günlük yaşta 10 adet SPF civcivin her birine beyin içi yolla enjekte edilir. Bu civcivler inokulasyon esnasında 24 saatten küçük, 40 saatten büyük olmamalıdır.
Civcivler 8 gün süreyle 24 saat aralıklarla gözlenerek puanlandırılır
Bu süre içerisinde her gözlemlemede her bir civciv puanlandırılır; 0=normal, 1= hasta, 2= ölü ( ölen civcivler takibeden her gözlemde 2 olarak puanlandırılır).
Intracerebral Patojenite Index (ICPI), 8 günlük periyot boyunca her gözlemde her civciv için verilen ortalama puandır.
Çok virulent virüsların indeks değerleri maksimum 2, lentojenik suşların ise 0.0 dolayındadır.
