Oʼzbekiston respublikаsi oliy vа oʼrtа mаxsus tа'lim vаzirligi fаrgʼonа dаvlаt universiteti tаbiiy fаnlаr fаkulteti biologiyа yoʼnаlishi



Yüklə 1,5 Mb.
səhifə11/18
tarix11.11.2023
ölçüsü1,5 Mb.
#131829
1   ...   7   8   9   10   11   12   13   14   ...   18
kurs ishi MINGBOYEV FARHODJON 19.58-guruh

2.BOB. MATERIAL VA METODLAR.
2.1. Mitoxondriya ichki membranasi o'tkazuvchaiiLigining o'zgarishini aniqlash
Mitoxondriyalaming shishish kinetikasi (1 mg oqsil/ml SI) aniqlash 280C haroratda 540 nm to'lqin uzunlikda 3 ml hajmli kyuvetadagi mitoxondriya suspenziyasining optik zichligining o'zgarishiga asoslanadi. Energiyalangan mitoxondriyalar uchun inkubasiya muhiti tarkibi quyidagicha: 125 mM KC1, 10 mM tris-HCl, 2,5 mM KH2PO4, 1mM EGTA, 5 mM glutamat, 1 mM malat, pH 7,4; energiyalanmagan mitoxondriyalar uchun esa - 0,24 M saxaroza, 10 mM tris-HCl, 1mM EGTA, 1 mkM rotenon, pH 7,4. Muhit tarkibidagi kalsiy konsentrasiyasini aniqlash uchun Ca2+-EGTA buferidan foydalanildi.
2.2. Mitoxondriyalar ichki membranasining turli kationlar uchun o'tkazuvchanligining o'zgarishini aniqlash
Mitoxondriya membranasi passiv transport turli tuzli eritmalarda (2.1jadval) ularning energiyaga bog'liq bo'lmagan shishish kinetikasi bo'yicha baholanadi. Elektrolitlar ishtirokidagi osmotik shishish muhim ahamiyatga ega. Mitoxondriya matriksiga anion va kationlaming kirishi natijasida organella ichida osmotik bosimning oshishiga sabab bo'ladi, lekin bu diffuziya potensialiga bog'liq emas. Mitoxondriya ichki membrana orqali H+- o'tkazuvchanlikni aniqlash uchun ammoniy nitratning izoosmotik eritmasidan foydalanildi. Mitoxondriya membranasi NO3- va NH3+ ionlari uchun yaxshi o'tkazuvchanlikka ega, lekin NH+ ionlari uchun o'tkazuvchan emas.

2.1-jadval
Jigar mitoxondriyasi ichki membranasining passiv o'tkazuvchanligini о’rganish uchun inkubasiya muhitlari

O'rganiladigan o'tkaziuchanlik

Muhitning asosiy komponentlari

Вufer (pH-7.4)

Vodorod

130 mM NH4NO3

10 mM tris-NO3

Natriy

130 mM NaNO3

10 mM tris-NO3

Kaliy

130 mM KNO3

10 mM tris-NO3

Magniy

86 raM Mg(NO3)2

10 mM tris-NO3

Kalsiy

86 raM Ca(NO3)2

10 mM tris-NO3




Yüklə 1,5 Mb.

Dostları ilə paylaş:
1   ...   7   8   9   10   11   12   13   14   ...   18




Verilənlər bazası müəlliflik hüququ ilə müdafiə olunur ©muhaz.org 2024
rəhbərliyinə müraciət

gir | qeydiyyatdan keç
    Ana səhifə


yükləyin