Tayyorladi: Muqimjonova Muyassar Qabul qildi:____________________
Toshkent-2022
Mavzu: BbvCI nukleazasi tuzilishi.
Reja: BbvCI nukleazasi haqida ma’lumot
Geterodimerik cheklash endonukleaza BbvCI ning turli bo'linmalari tomonidan individual DNK zanjirlarining bo'linishi
Geterodimerik restriksion endonukleaza R.BbvCIning saytga xos DNK-nicking mutantlari
Foydalanilgan adabiyotlar
BbvCI nukleazasi haqida ma’lumot BbvCI,IIT tipidagi cheklovchi endonukleaz,yetti tayanch juftlik 5'-CCTCAGC-3' ketma-ketligini taniydi va ajratadi,bu 3-asosli,5'-o'simtalarni hosil qiladi.BbvCI ikkita oqsil bo'linmasidan iborat bo'lib,ularning har biri bitta katalitik joyni o'z ichiga oladi.Ikkala sayt mutatsiya natijasida inaktivatsiya qilinishi mumkin,natijada DNKni o'ziga xos tarzda bog'laydigan ferment variantlari paydo bo'ladi.Bu erda biz holoenzimning labil ekanligini,R1 subbirligi past pH da dissotsilanishini ko'rsatamiz.Bunday sharoitda R2 subunitining kristallanishi qarama-qarshi tomonlarda joylashgan ikkita katalitik joy bilan cho'zilgan dimerni aniqladi.
Fiziologik pH da keyingi kristallanish natijasida har bir subunitning ikkita nusxasidan iborat tetramer aniqlandi,ularning har birida DNK parchalanishi uchun mos ravishda joylashtirilgan va yo'naltirilgan ikkita katalitik joyni o'z ichiga olgan bir juft chuqur yoriqlar mavjud.Ushbu domen tashkiloti bir zanjirli oqsil konstruksiyalari bilan yana tasdiqlandi,unda ikkita ferment bo'linmasi o'zgaruvchan uzunlikdagi peptid bog'lovchilari orqali bog'langan.Biz DNK bilan bog'langan kompleksni kristallashtira olmadik;ammo,ilgari kristallangan cheklash endonukleazalarining strukturaviy o'xshashligi DNK bilan bog'langan energiya minimallashtirilgan modelni yaratishga va maqsadni tanib olish uchun mas'ul bo'lgan nomzod qoldiqlarini aniqlashga yordam berdi.Markaziy C:Gtayanch juftligini tan olish uchun taxmin qilingan qoldiqlarning mutatsiyasi CCTNAGC ni (N= har qanday asos)taniydigan va parchalaydigan o'zgartirilgan fermentga olib keldi.Ilgari kristallangan cheklash endonukleazlariga tizimli o'xshashlik DNK bilan bog'langan energiyani minimallashtirilgan modelni yaratishga va maqsadni aniqlash uchun mas'ul bo'lgan nomzod qoldiqlarini aniqlashga yordam berdi.Markaziy C:Gtayanch juftligini tan olish uchun taxmin qilingan qoldiqlarning mutatsiyasi CCTNAGC ni (N= har qanday asos)taniydigan va parchalaydigan o'zgartirilgan fermentga olib keldi.Ilgari kristallangan cheklash endonukleazlariga tizimli o'xshashlik DNK bilan bog'langan energiyani minimallashtirilgan modelni yaratishga va maqsadni aniqlash uchun mas'ul bo'lgan nomzod qoldiqlarini aniqlashga yordam berdi.Markaziy C:Gtayanch juftligini tan olish uchun taxmin qilingan qoldiqlarning mutatsiyasi CCTNAGC ni (N= har qanday asos)taniydigan va parchalaydigan o'zgartirilgan fermentga olib keldi.