Purificação da sub-fração bioativa da fração clorofórmica
Para a montagem da coluna, com base na metodologia descrita por Alencar (2002) com objetivo de realizar a purificação da sub-fração bioativa da fração clorofórmica será utilizado o gel lipofílico Sephadex LH-20. As sub-frações bioativas obtidas pelo fracionamento em coluna secas serão concentradas em rotaevaporador a 45ºC e, então preparadas soluções pela dissolução de 150 mg em 2 mL de metanol. Em seguida, serão aplicadas no topo da coluna de gel Sephadex LH-20 e após a total penetração da amostra no gel, serão eluídas com metanol. As sub-frações obtidas serão avaliadas por cromatografia em camada delgada, tendo anisaldeído sulfúrico a quente como revelador, e teste de bioautografia para a determinação das sub-frações bioativas destinadas ao isolamento dos compostos por CLAE-preparativa.
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