| Isolamento dos compostos com atividade antifúngica
As sub-frações bioativas selecionadas previamente pela coluna de Sephadex LH-20 serão recromatografadas em um sistema de cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) preparativa, utilizando-se uma coluna preparativa Shimadzu PREPODS (H) (250 x 20 mm), para o isolamento dos compostos bioativos. A fase móvel utilizada será 35% do solvente A (água) e 65% do solvente B (metanol). Os picos dos compostos eluídos serão recolhidos em um coletor automático de frações (FRC-10A, Shimadzu Co.), acoplado ao sistema de cromatografia.
Análises físico-químicas do EEP, frações, sub-frações e compostos isolados
Espectrofotometria na região ultravioleta-visível dos compostos isolados A determinação do espectro de absorção dos compostos isolados será realizada segundo o método descrito por Park et al. (2000), Ikegaki (2001) e Alencar (2002), com algumas modificações. Alíquotas de 25 μL dos compostos isolados serão diluídos em 30 mL de metanol P.A. e os espectros de absorção na região UV-visível serão determinados na faixa de comprimento de onda de 200 a 500 nm em espectrofotômetro UV-Mini 1240 (Shimadzu-Co).
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