Republic of turkey

Serolojik testler

ND virüsu, teşhis için kullanılan nötralizasyon veya enzyme-linked immunosorbent assays (ELISA) çok çeşitli serolojik testlerde antijen olarak da kullanılabilir. Şu anda HI testi en yaygın olarak kullanılan testtir. Tavuk serumu bu testte nadir olarak non spesifik pozitif reaksiyon verir ve bu tür serumu ön muameleye tutmak gereksizdir. Tavuk dışındaki türlere ait serumlar bazen tavuk eritrositleri (RBC) aglutinasyon oluşturabilir, dolayısıyla bu özellik öncelikle belirlenmeli ve sonra serumun tavuk eritrositleri ile adsorbsiyonu ile bu durum ortadan kaldırılır. Bu işlem için; her bir 0.5 ml seruma 0.025 ml tavuk eritrositi eklenip, hafifçe çalkalandıktan sonra oda ısısında en az 30 dakika bekletilir, daha sonra 800 g’de 2-5 dakika santrifüj edilirerek pelet oluşturulur. Adsorbe olan serum boşaltılır.

HA ve HI testleri için değişik laboratuvarlarda çeşitli prosedürler kullanılmaktadır. Aşağıda önerilen prosedür, her iki test içinde final volüm 0.075 ml olacak şekilde ve V dipli mikropleytler kullanılarak uygulanır. Testlerde kullanılan reagentler, izotonik PBS (0.1 M), pH 7.0–7.2 ve eşit hacimde alsever solüsyonuna en az 3 adet SPF piliçten (SPF bulunmadığı durumda ND virüsu antikoru taşımayan piliçlerden) alınan kanlardan hazırlanan eritrosit süspansiyonudur. Eritrositler 3 kez PBS ile yıkanarak %1 (eritrosit v/v)süspansiyon hazırlanır. Her testte, duruma göre pozitif ve negatif kontrol antijen/antiserumu kullanılmalıdır.

1.