Septembre 2002 n°199


La transformation cellulaire



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La transformation cellulaire

12. On augmente la fréquence de transformation d'Arabidopsis par Agrobacterium en utilisant une surexpression de la protéine nucléaire VIP1 de la plante.

VIP1 est importée dans le noyau par la voie caryopherine  dépendante. Il est vraisemblable qu'elle facilite la translocation du T-DNA vers le noyau. T Tzfira et al.; Proceedings of the National Academy of Sciences USA 99 (06AUG02) 10435-10440.

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L'expression génique

13. Le mécanisme du "silencing" d'un transgène marqueur commandé par le promoteur du virus bacilliforme tungro du riz, a été analysé par les groupes de Potrykus et de Futterer. A Kloti et al.; Proceedings of the National Academy of Sciences USA 99 (06AUG02) 10881-10886.

Le gène est progressivement méthylé, d'abord au niveau du promoteur, ce qui entraîne l'extinction de l'expression dans les tissus vasculaires. Il n'est observé que chez des plants homozygotes. Ce patron ressemble à celui d'un promoteur dont la séquence d'expression dans les tissus vasculaires a été délétée. La méthylation, en soi, n'a pas d'effet sur les facteurs de transcription "normaux" fonctionnant sur les séquences non méthylées. Par contre la méthylation des séquences permet le recrutement d'une protéine alternative spécifique, à la fois, de la séquence et de sa méthylation. La méthylation s'étend, ensuite, progressivement aux séquences codantes au cours des générations successives d'auto-fécondation et l'expression cesse, alors, dans des tissus non vasculaires. Le phénomène est donc progressif.

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La reproduction

14. Les chercheurs de DNA Plant Technology (filiale de la firme mexicaine Seminis Vegetable Seeds) décrivent comment piloter de façon précise une stérilité mâle. DG Burgess et al.; Plant Journal 31 (JUL02) 113-125.

L'ablation de cellules par expression d'un gène létal comme celui de la barnase (une RNase de Bacillus amyloliquefaciens pour obtenir une stérilité mâle a été utilisée, mais la spécificité d'expression doit être étroitement pilotée, faute de quoi des dommages collatéraux peuvent s'en suivre. Elle correspond à l'US Patent n°6 392 119 du 21MAY02. La technique consiste à renforcer la spécificité de l'expression en utilisant deux promoteurs tissus spécifiques avec recouvrement de spécificité tissulaire, pour piloter indépendamment l'expression de deux moitiés d'une protéine toxique comme la barnase. Les deux moitiés de cette enzyme de 110 aa à un seul domaine, isolément inactives, restituent l'activité quand elles sont co-exprimées dans la même cellule.

Les auteurs montrent, dans un premier temps que la reconstitution de l'activité est possible, puis que les deux moitiés exprimées dans des plantes séparées donnent lieu à une reconstitution quand elles sont croisées.

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15. Des chercheurs de Strasbourg décrivent une nouvelle isoforme d'-tubuline spécifique du pollen chez le Tournesol. Cette () tubuline est la plus divergente connue, avec une délétion de la boucle H1/B2 et une extrémité C-terminale riche en glutamine associée à la -tubuline. Parmi les plantes étudiées, seuls les cosmos (également des composées) en possèdent. JL Evrard et al.; Plant Molecular Biology 49 (AUG02) 611-620.

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