Mogi biti kvalitativni I kvanititativni Kvalitativni

• Mogi biti kvalitativni i kvanititativni

• 1. Kvalitativni

• rezultat može biti pozitivan ili negativan

• 2. Kvanititativni

• za određivanje, Ag, ukupnih ili specifičnih At

Solubilni antigen – imunoprecipitacija

• Solubilni antigen – imunoprecipitacija

• Partikularni antigen – imunoaglutinacija

1. Direktna (aktivna)

• 1. Direktna (aktivna)

• 2. Indirektna (pasivna)

• 3. Antiimunoglobulinski test (Coombsov test)

• 4. Inhibicija hemaglutinacije

Aktivna aglutinacija

• Aktivna aglutinacija

• Testovi za dokazivanje bakterija

• Salmonella, vibrio...

Titar antitela je laboratorisjki test za određivanje prisustva i količine antitela u serumu

• Titar antitela je laboratorisjki test za određivanje prisustva i količine antitela u serumu

• predstavlja recipročnu vrednost najvećeg razblaženja seruma koje daje jasno vidljivu aglutinaciju.

Pasivna (indirektna) aglutinacija

• Pasivna (indirektna) aglutinacija

• Antigen ili antitela su vezana za neke čestice kao što su lateks ili karbonske čestice

Rose Waalerov test

• Rose Waalerov test

• Za određivanje prisustva anti-IgG antitela

• Stari test- Kada se ovčiji eritrociti pomešaju sa određenom koncentracijom antiseruma specifičnog za ovčije eritrocite, a kada se doda serum pacijenata sa reumatoidnim artritisom dolazi do aglutinacije

• Test lateks aglutinacije

Koriste se anti-imunoglobulinska antitela da bi se detektovala antitela koja dovode do hemolitičke bolesti novorođenčeta (lat. Erythroblastosis fetalis).

• Koriste se anti-imunoglobulinska antitela da bi se detektovala antitela koja dovode do hemolitičke bolesti novorođenčeta (lat. Erythroblastosis fetalis).

• Hemolitička bolest novorođenčeta -majka produkuje IgG antitela specifična za Rh antigen

• Anti-Rh IgG antitela oblažu fetalne eritrocite, koji bivaju uništeni od strane fagocita u jetri što prouzrokuje hemolitičku anemiju fetusa i smrt novorođenčeta

• Detekcija anti-Rh antitela je bila teška dok nisu otkrivena anti-humana imunoglobulinska antitela

I Tečni medijum

• I Tečni medijum

• Interfacijalni test prstena

• Klasična kvantitativna imunoprecipitacija

• Nefelometrija

• II Polučvrsti medijum

• Dvostruka imunodifuzija

• Jednostruka radijalna imunodifuzija - RID

• Brza i jednostavna metoda za kvantifikaciju mnogih antigena u različitim biološkim tečnostima (serum, plazma, likvor, sinovijalna tečnost, itd)

• Mešanje konstantne količine visoko purifikovanog monospecifičnog antitela i rastvora različitih koncentracija antigena

• Mikroprecipitati lebde - zamućenje rastvora

• Stepen zamućenja se određuje na osnovu rasipanja upadnog zraka svetlosti (nefelometrija) i proporcionalan je koncentraciji antigena

Kroz polučvrst medijum difunduju i antigen i antitelo i na mestu optimalnog odnosa obrazuje se precipitinska linija

• Kroz polučvrst medijum difunduju i antigen i antitelo i na mestu optimalnog odnosa obrazuje se precipitinska linija

• Udaljenosti precipitinske linije od mesta nanošenja antigena i antitela zavisi od koeficijenta difuzije antigena i antitela, i njihove koncentracije

• Broj precipitinskih linija zavisi od broja prisutnih antigen-antitelo sistema

• Mogućnost detekcije broja antigena odnosno antitela, identifikaciju antigena ili antitela, i određivanje srodnosti raznih antigena.

Brz i senzitivan test za detekciju proteina/Ag posebno onih koji su prisutni u maloj koncentraciji

• Brz i senzitivan test za detekciju proteina/Ag posebno onih koji su prisutni u maloj koncentraciji

Radioimunotestovi (RIA)

• Radioimunotestovi (RIA)

• Enzimimunotestovi (ELISA)

• Imunohistohemijske tehnike

Abnormalnosti serumskih imunoglobulina pojavljuju se u

• Abnormalnosti serumskih imunoglobulina pojavljuju se u

• autoimunskim

• infektivnim

• imunodeficijentnim i

• limfoproliferativnim poremećajima

• Kvalitativne, kvantitativne i funkcionalne procene serumskih imunoglobulina

Mehanizmi molekulskih interakcija značajne za ostvarivanje funkcija humoralnog imunskog odgovora:

• Mehanizmi molekulskih interakcija značajne za ostvarivanje funkcija humoralnog imunskog odgovora:

• kvantitativno određivanje koncentracija

• imunološka identifikacija

• karakterizacija

• Određivanje ukupnih proteina

• Biuretska, tanin turbidimetrijska, metoda taloženja trihlorsirćetnom kiselinom i dr

• Elektroforetske tehnike

• Metoda po Grabar-Williams-u ili mikrozonska elektroforeza po Shidigger-u, na acetatnoj celulozi ili agaroznom gelu

Serumske elektorforeze (jednostavna, jeftina, brza tehnika) obezbeđuje informacije o povećanju i smanjenju ukupnih serumskih imunoglobulina i prisustvu monoklonskih traka

• Serumske elektorforeze (jednostavna, jeftina, brza tehnika) obezbeđuje informacije o povećanju i smanjenju ukupnih serumskih imunoglobulina i prisustvu monoklonskih traka

• Karakterizacija – imunofiksacija

• Kvantifikacija klasa imunoglobulina – nefelometrija

• Funkcionalna aktivnost – merenje izoaglutinina (IgM)

Zonska elektroforeza (semikvantitativna)

• Zonska elektroforeza (semikvantitativna)

Kvantifikacija imunoglobulina i drugih proteina

• Kvantifikacija imunoglobulina i drugih proteina

• Radijalna imunodifuzija (RID)

• Nefelometrija

• Kvantifikacija IgG klasa

• RID, ELISA, nefelometrija

Rekurentne bakterijske infekcije

• Rekurentne bakterijske infekcije

• Autoimunske bolesti sa prominentnim imunski kompleks interakcijama

• Test titracije komplementa (hemolitički test-CH50/100)

• C3, C4 i properdin kvantifikacija

• C3 nefrotski faktor

• C1 esteraze inhibitor

• C1q vezujući metod za imunske komplekse

• cirkulišući imunski kompleksi

Indirektna imunofluorescenca (ANA, tkivna autoantitela i anti-neutrofilna citoplazmatska antitetla-ANCA)

• Indirektna imunofluorescenca (ANA, tkivna autoantitela i anti-neutrofilna citoplazmatska antitetla-ANCA)

• Aglutinacija (tiroidna antitela, RF)

• Imunoprecipitacija (ENA-antitela specifična za ekstraktabilni nuklearni antigen, antitela specifična za ds DNK i nuklearne antigene)

• RIA (anti-ds DNK antitela) i ELISA

ANCA-Wegener-ova granulamatoza

• ANCA-Wegener-ova granulamatoza

• Antitela specifična za ACH receptor (Miastenija gravis)

• ANA – sistemske reumatske bolesti (SLE, polimozitis, skleroderma, Sjogren-ov sindrom), reakcije na lekove, hronične infekcije, RA i druge autoimunske bolesti

• Anti-fosfolipidna antitela

• – anti-fosfolipidni sindrom

• RF (IgM, IgA ili IgG)

Imunski sistem je kontrolisan velikim brojem ćelija i u dobro balansiranom imunskom sistemu ove ćelije međusobno efikasno interaguju

• Imunski sistem je kontrolisan velikim brojem ćelija i u dobro balansiranom imunskom sistemu ove ćelije međusobno efikasno interaguju

• U imunskim bolestima taj odnos je poremećen

• Identifikacija ćelija – fenotipska analiza

• Određivanje njihove funkcije ili funkcionalnog potencijala – in vitro funkcionalni testovi

Citokini i solubilni citokinski receptori

• Citokini i solubilni citokinski receptori

• ELISA

• ELISA spot

• Merenje mRNK

• Inflamatorni pokazatelji

• Serumska elektroforeza

• CRP - nefelometrija

• SE

• Kvantifikacija serumskog β2-mikroglobulina (RID, ELISA)

• Tumorski markeri

• RIA, ELISA, imunofluorescenca (tkiva)

Za identifikaciju ćelijskih antigena i produkata na presecima tkiva

• Za identifikaciju ćelijskih antigena i produkata na presecima tkiva

• Svetlosni, elektronski ili florescentni mikroskop

• Direktna

• Indirektna

• Pozitivne i negativne kontrole

Reakcije preosetljivosti Tip I

• Reakcije preosetljivosti Tip I

• ukupni IgE (RIST)

• alergen specifični IgE (RAST)

• in vivo intradermalni test

• Reakcije preosetljivosti Tip II

• Coombs-ov test

• Reakcije preosetljivosti Tip III

• Autoantitela

• Reakcije preosetljivosti Tip IV

• Mantoux kožni test

• Funkcije T ćelija – proliferacija i produkcija citokina