Dışkıdan hazırlanan supernatant sıvı ya da doku suspansiyonları, soğuk şartlarda, 1000 g’ de 10 dakika santrifüj edilerek üstteki sıvı alınır. Santrifüj işleminden sonra üstteki sıvıdan 5 adet 9-11 günlük embriyolu SPF yumurtanın allantoik boşluğuna 0.2 ml miktarında inokule edilir. İnokulasyondan sonra yumurtalar 35–37°C’de 4–7 gün boyunca inkübe edilir. Bu süre içinde 24 saat aralıklarla yumurtaların canlılık muayenesi yapılır. Ölü veya ölmekte olan embriyoları içeren yumurtalar ve inkübasyon periyodunun sonunda canlı kalan tüm yumurtalar buzdolabında 1 gece bekletilir. Bu sürede ölmeleri ve kan damarlarının çekilmesi sağlanır. Daha sonra yumurtaların allantoik sıvıları toplanarak hemaglutinasyon aktivitesi (HA) yönünden test edilir. Hemaglutinasyon tespit edildiği durumda bakteriyal kontaminasyonun varlığı açısından ekim yapılır. Bakteriyal kontaminasyonun olduğu durumda allantoik sıvı 450 nm’lik membran filtreden geçirilir, antibiyotkik eklenerek tekrar embriyolu yumurtalara inokule edilir. HA aktivitesinin varlığı, yüksek ihtimalle bir Avian Influenza virüsu yada Avian Paramyxovirüs’un varlığını gösterir. Hemaglutinasyon tespit edilemeyen materyallere ait inokulumların, negatif olarak raporlanmadan önce ETY’ da tekrar pasajları yapılır.
