Predgovor

---

Oznaka: 0098107

NOVE MOGUĆNOSTI LIJEČENJA TUMORA DOJKE

NEW THERAPEUTIC POSSIBILITIES IN BREAST CANCER
Voditelj projekta: dr. sc. Josip Unušić

Tel. ++385 1 4561 172   e-mail: [e-mail]

Suradnici
Krešimir Pavelić, doktor med. znanosti, znanstveni savjetnik (konzultant)
Jasminka Pavelić, doktorica biol. znanosti, znanstvena savjetnica (konzultantica)
Neda Slade, doktorica biol. znanosti, znanstvena suradnica

Vanjski suradnici
Krešimir Bulić, asistent, Klinički bolnički centar Zagreb, Zagreb
Ivo Džepina, doktor med. znanosti, viši asistent, Klinički bolnički centar Zagreb, Zagreb
Davor Hulina, asistent, Klinički bolnički centar Zagreb, Zagreb
Radojko Ivrlač, doktor med. znanosti, Klinički bolnički centar Zagreb, Zagreb
Šimun Križanac, doktor med. znanosti, Medicinski fakultet, Sveučilište u Zagrebu, Zagreb (konzultant)
Josip Unušić, redoviti profesor, Medicinski fakultet, Sveučilište u Zagrebu, Zagreb

Program rada i rezultati na projektu:

U suradnji s projektom dr. S. Kapitanović i dr. Majom Sirotković-Skerlev istraživali smo intenzitet ekspresije proteinskih produkata c-myc, erbB2, p53 i nm23-H1 u dobroćudnim i zloćudnim lezijama dojke te procijeniti moguću koekspresiju dvaju ili više proteina. Rezultate imunohistokemijskih analiza korelirali smo s različitim kliničko patološkim pokazateljima. Glavna metoda bila je imunohistokemijska detekcija. Zabilježili smo visok stupanj ekspresije proteina c-myc u malignim i benignim lezijama (95% i 100%). Ekspresija erbB2 i mutirajuće forme proteina p53 u malignim je lezijama iznosila 27% odnosno 34%. Iako su ti proteini bili prisutni i u benignim lezijama postotak je bio znatno niži (7,8% odnosno 19,6%). Ekspresija proteina nm23-H1 slična je i u benignim i u malignim lezijama. Koekspresija nm23-H1 i mutiranog p53 proteina zabilježena je u 16,5 % karcinoma.

Research programme and results:

In colaboration with dr. S. Kapitanović and dr. M. Sirotković-Skerlev the aims of this study were to assess the expression of protein products of c-myc, erbB-2, p53 and nm23-H1 gene in benign and malignant breast lesions, to estimate their possible coexpression and to correlate the results of immunohistochemical analysis with various clinocopathologic parameters. The method used was the immunohistochemical detection of the corresponding protein. Expression of c-myc protein was high in both malignant and benign lesions (95% and 100%). Expression of erbB-2 and mutated p53 proteins in malignant lesions was 27% and 34%. These proteins were present in benign lesions as well: 7.8% of benign lesions were positive for erbB-2 protein and 19.6% for p53 protein. The expression of nm23-H1 protein was similar in benign and malignant lesions: 47% and 54%. The coexpression of nm23-H1 and mutated p53 protein was found in 14 carcinomas (16.5%).

---

Oznaka: 0098108

MOLEKULARNA GENETIKA TUMORA GASTROINTESTINALNOG SUSTAVA

MOLECULAR GENETICS OF GASTROINTESTINAL TUMORS
Voditeljica projekta: dr. sc. Sanja Kapitanović

Tel. ++385 1 4561 108   e-mail: [e-mail]

Suradnici
Tamara Čačev, magistrica biol. znanosti, znanstvena novakinja u suradničkom zvanju asistentice
Sanja Kapitanović, doktorica med. znanosti, viša znanstvena suradnica, u zvanju znanstvene savjetnice od 26.11.2005.
Krešimir Pavelić, doktor med. znanosti, redoviti profesor, znanstveni savjetnik (konzultant)

Vanjski suradnici
Helena Kapitanović Vidak, doktorica med. znanosti, Specijalna bolnica Goljak, Zagreb
Šimun Križanac, doktor med. znanosti, Klinička bolnica Dubrava, Zagreb (konzultant)
Marina Premužić, doktorica med. znanosti, Klinički bolnički centar Zagreb, Zagreb
Radan Spaventi, doktor med. znanosti, PLIVA d.d. Zagreb
Boris Vucelić, doktor med. znanosti, Klinički bolnčki centar Zagreb, Zagreb (konzultant)

Program rada i rezultati na projektu:

Tijekom 2005. godine nastavili smo s prikupljanjem uzoraka karcinoma kolona i pripadajućeg normalnog tkiva sluznice u Hrvatsku banku tumora za bazična istraživanja.

Gubitak heterozigotnosti tumor supresorskog gena CDH1 ispitivali smo metodom  VNTR te novouspostavljenom metodom analize SNP polimorfizama uz pomoć "real-time" PCR uređaja. (rad je objavljen u J Cancer Res Clin Oncol 2006, 132(3): 200-204).

U suradnji s projektom 0098109 nastavljena su istraživanja antitumorskog učinka indometacina na trajnim staničnim linijama karcinoma kolona. Rezultati ovog istraživanja daju novo moguće objašnjenje antiproliferativnog učinka indometacina kroz njegov utjecaj na staničnu adheziju. Rezultati su objavljeni u radu Exp Mol Pathol 2006, 80(1): 91-96.

Tijekom ovog projektnog razdoblja također smo ispitali i ispoljenost proteina c-myc, erbB-2, p53 te nm23-H1 u dobroćudnim te zloćudnim lezijama dojke. Rezultati ovog istraživanja objavljeni su u radu Exp Mol Pathol 2005, 79: 42-50.

Na uzorku sporadičnih karcinoma kolona anlizirali smo gubitak heterozigotnosti i ekspresiju gena NF1. Gubitak heterozigotnosti gena NF1 dokazali smo u 21% sporadičnih karcinoma kolona. Ekspresija gena NF1 bila je značajno niža u loše diferenciranim tumorima te u tumorima klasificiranim kao Dukes’ C. Također je ispitana ekspresija dviju izoformi mRNA gena NF1. Izoforma tip I bila je dominantno eksprimirana izoforma u tkivu tumora dok je izoforma tip II bila dominantno eksprimirana u normalnom tkivu sluznice debelog crijeva. U nekoliko parova tumora i pripadajuće normalne sluznice uzete s različite udaljenosti od ruba tumora opažen je postepeni prijelaz iz dominantne ekspresije izoforme tip II u normalnoj sluznici debelog crijeva na udaljenosti 15 cm od ruba tumora ka prevladavajućoj ekspresiji izoforme tip I u tkivu tumora. Ovi rezultati su zajedno s prethodnim rezultatima analize gubitka heterozigotnosti i ekspresije gena NF1 objavljeni u radu Gut 2005, 54: 1129-1135.

Research programme and results:

During the third year of our research we have continued our research on processes involved in colon cancer development and progression. We have finalized and published  results of  CDH1 gene VNTR and SNP polymorphism LOH analysis (Journal of Cancer Research and Clinical Oncology 2006, 132(3): 200-204.).

In collaboration with project 0098109  we have continued testing indomethacin anti-tumor activity on colon cancer cell lines in vitro. Results of this analysis gave new insights into antiproliferative effect of indomethacin through its impact on cell adhesion. These results have been published in Experimental and Molecular Pathology 2006, 80(1): 91-96.

We have also investigated expression of c-myc, erbB-2, p53 and nm23-H1 in breast benign and malignant lesions. Results of this analysis  have been published in Experimental and Molecular Pathology 2005, 79: 42-50

Real-time RT-PCR was used to determine NF1 mRNA expression in tumors and corresponding normal mucous tissue. Relative ratio of NF1 mRNA type I and II isoforms expression was examined as well. NF1 gene expression was significantly increased in tumor tissue compared to corresponding normal tissue. There was a statistically significant increase of NF1 mRNA type I isoform expression in tumor tissue when compared to corresponding normal colon tissue. These results have been published in Gut 2005, 54: 1129-1135