Tez özetleri Astronomi ve Uzay Bilimleri Anabilim Dalı

Deneysel Olarak Enfekte Edilen Gökkuşağı Alabalığı (Oncorchynchus Mykiss)’ Nda Flavobacterium Psychrophilum’ Un Floresan Antikor Teknikleri İle Saptanması Üzerine Bir Araştırma.

Bu çalışma, Flavobacterium psychrophilum ile deneysel olarak enfekte edilen yavru gökkuşağı alabalığı (Oncorchynchus mykiss) dokularındaki patojen bakteri ve serumlarındaki spesifisik antikor varlığının İndirekt Floresan Antikor Tekniği (İFAT) kullanılarak kısa sürede tespit edilmesi amacı ile yürütülmüştür.

Çalışmada, yavru gökkuşağı alabalıklarında deneysel enfeksiyon oluşturmak için F.psychrophilum bakterisi balıklara intraperitonal olarak enjekte edilmiştir. Enfekte balıklarda iştahsızlık, vücutlarının yan yüzlerinde ülseratif lezyonlar, solgun solungaçlar, vücut renginde koyulaşma, dalakta büyüme ve boş bağırsaklar tespit edilmiştir.

Etken bakteri enfekte balıkların iç organlarından re-izole edilerek, klasik bakteriyolojik yöntemlerle identifiye edilmiştir.

Enfekte balıkların dokularındaki F.psychrophilum’u tespit etmek için dokulardan hazırlanan ezme preperatlar üzerine sırasıyla anti-F.psychrophilum poliklonal tavşan antikoru ve anti-tavşan IgG FITC konjugatı konularak inkübe edilmiştir. Serum örnekleri için ise lam üzerine çizilen halkalar F.psychrophilum antijeni ile kaplanarak hasta balık serumları bu halkalara konmuş ve üzerlerine sırasıyla anti-salmon immunoglobulun poliklonal tavşan antikoru ve anti-tavşan IgG FITC konjugatı konularak inkübe edilmiştir. Böylece dokudaki patojen bakteri ve serumdaki spesifik antikorlar FITC ile işaretlenmiş ve preperatların floresan mikroskopta incelenmesiyle antijen-antikor komplekslerinin varlığını ortaya koyan yeşil floresan görünümler tespit edilmiştir.

Bu çalışmada, hastalığın klasik bakteriyolojik yöntemlerle teşhisi yaklaşık 3 hafta sürerken, İFAT ile yaklaşık 1 gün içinde yapılmıştır. Sonuçlar, F.psychrophilum enfeksiyonlarının teşhisinde floresan antikor tekniğinin hızlı ve duyarlı bir yöntem olarak kullanılabileceğini göstermiştir.

A Study On Using Of Fluorescent Antibody Techniques For Detecting Of Flavobacterium Psychrophilum İn Experimentally Infected Rainbow Trout (Oncorhynchus Mykiss)

The present work was carried out to rapidly detect the pathogen bacteria in the tissues and specific antibody in the antisera both those obtained from experimentally infected young rainbow trout (Oncorhynchus mykiss) with Flavobacterium psychrophilum, using by Indirect Fluorescent Antibody Technique (IFAT).

In this study, young rainbow trout were injected intraperitoneally with F.psychrophilum for producing experimental infection. Infected fish showed poor appetite, ulcerations of skin, pale gills, dark pigmentation of skin, enlarged spleen and empty intestinal tract.

Pathogen bacteria was isolated from visceral organs of infected fish and identified by using conventional bacteriological methods.

For detecting F.psychrophilum in the tissues of infected fish, anti-F.psychrophilum polyclonal rabbit antibody and anti-rabbit IgG FITC conjugated were overlaid on squashed preparations prepared from infected fish tissues on slides and the slides were incubated. The serum samples of experimentally infected fish were overlaid on the wells of the slides coated with the antigen of F.psychrophilum and the slides were incubated, then anti-salmon immunoglobulin polyclonal rabbit antibody and anti-rabbit IgG FITC conjugated were overlaid on these complexes and incubated. In this way, pathogen bacteria in tissues and specific antibody in antiserum were cojugated with FITC and green fluorescence, demonstrating presence of antigen-antibody complexes, were determined by using fluorescence microscope.

In this study, diagnosis of the disease by using conventional bacteriological methods took time of three weeks, while just taking time of a day with IFAT. These results showed that fluorescent antibody technique can be use in diagnosis of F.psychrohilum infections as fast and sensitive technique.