FiZİko-kimyasal özelliklerin belirlenmesinde kullanilan yöntemler
BÖLÜM II. DOC DIE-AWAY (Kaybolum) TESTİ (Yöntem C.4-A)
Yüklə 5,29 Mb.
|
- Bu səhifədəki naviqasiya:
- BÖLÜM III. DEĞİŞTİRİLMİŞ OECD TARAMA TESTİ (Yöntem C.4-B)
BÖLÜM II. DOC DIE-AWAY (Kaybolum) TESTİ (Yöntem C.4-A) II.1 Test yönteminin ilkesi Esas nominal organik karbon kaynağı olarak bilinen bir test maddesi konsantrasyonu (10-40 mg DOC/L)içeren aşılanmış mineral ortamın ölçülen miktarı (hacmi) 22±2 oC’de karanlık ya da dağılmış ışıkta havalandırılır. Bozunmayı, 28 günlük süre boyunca sıklıkla tekrarlanan aralıklardaki DOC analizi takip eder. Biyolojik bozunabilirlik derecesi başlangıçta mevcut olan konsantrasyon yüzdesi olarak uzaklaştırılan DOC konsantrasyonu (kör aşı kontrolü için düzeltilen) ifade edilerek hesaplanır. Başlangıç biyolojik bozunabilirlik derecesi aynı zamanda inkübasyon (kuluçka) başlangıç ve bitişinde yapılan ek kimyasal analizlerinden hesaplanabilir. II.2 Test yönteminin tanımlanması II.2.1 Cihazlar (a) konik cam balonlar, örneğin DOC analizi için gerekli olan hacme bağlı olarak 250 ml’den 2 l’ye kadar; (b) ya otomatik ısı kontroluyla birlikte ya da sabit oda sıcaklığında kullanılan konik cam balonları yerleştirmek için ve tüm cam balonlarda havalandırma şartlarını sağlamak için yeterli güçte çalkalama makineleri; (c) uygun membranlı süzme düzenekleri; (d) DOC analiz cihazı; (e) çözünmüş oksijeni belirlemek için düzenek; (f) santrifüj. II.2.2 Mineral ortamının hazırlanması Stokt çözeltilerinin hazırlanması için I.6.2 bölümüne bakınız. 800 ml seyreltme suyuyla 10 ml çözeltiyi (a) karıştırın, 1 ml (b) ve (d) çözeltisi ekleyin ve seyreltme suyuyla birlikte 1 litreye ayarlayın. II.2.3 Aşının hazırlanması ve ön şartlandırılması
I.6.4, I.6.4.1, I.6.4.2 ve I.6.5 bölümlere bakınız. II.2.4 Cam balonların hazırlanması Örnek olarak, 2 L’lik konik cam balonlara 800 ml mineral ortamdan koyun ve 10-40 mg DOC/l’ye eşit kimyasal konsantrasyonu sağlamak için farklı cam balonlara test ve referans maddelerinin stok çözeltilerinden gerekli miktarda ekleyin. pH değerlerini kontrol edin ve gerekli olduğu takdirde 7,4’e ayarlayın. 30 mg askıda katı/l’den fazla olmayan son konsantrasyonu elde etmek için aktif çamur ya da diğer aşı kaynaklarıyla (I.6.4 bölüme bakınız) cam balonları aşılayın. Aynı zamanda test veya referans kimyasalları olmadan mineral ortamda aşı kontrolleri hazırlayın. Gerekli olduğu takdirde, mineral ortamda, hem test hem de referans kimyasalları bakımından karşılaştırılabilir konsantrasyonlar ihtiva eden bir çözelti aşılama yoluyla test kimyasallarının olası yavaşlatıcı (inhibe edici) etkisini kontrol etmek için bir kap kullanın. Aynı zamanda gerekli olduğu takdirde, bu test aşılanmamış çözeltisini kullanılarak abiyotik olarak bozunmaya uğrayıp uğramadığını kontrol etmek için başka steril cam balon kullanın.(I.6.6 bölüme bakınız) Buna ilaveten test kimyasalının cam ve atık su gibimalzemeler tarafından kayda değer oranda adsorplandığından şüphe ediliyorsa, olası adsorpsiyon var olup olmadığını ve böylelikle kimyasal madde için testin uygunluğunu belirlemek için bir ön değerlendirme yapın (Tablo 1’e bakınız). Test maddesi, aşı ve sterilize edici madde ihtiva eden bir cam balon hazırlayın. Tüm cam balonlardaki hacimleri (miktarları) mineral ortamla birlikte 1 L yapınız ve karıştırdıktan sonra DOC’nin ilk konsantrasyonunu saptamak için her bir cam balondan örnekler alınız (Ek-II.4’e bakınız.) Cam balonların ağızlarını örneğin alüminyum folye ile cam balon ve çevreleyen atmosfer arasında serbest hava geçişine izin verecek şekilde kapatınız. Daha sonra testi başlatmak için kapları çalkalama düzeneğine yerleştiriniz. II.2.5. Tipik çalışmada cam balon numaraları Kap 1 ve 2: test süspansiyonu Kap 3 ve 4 cam balon: kör aşı Kap 5: işlem kontrolu Tercihen ve gerekli olduğu yerlerde: Kap 6: abiyotik steril kontrolu Kap 7: adsorpsiyon kontrolu Kap 8: toksisite (zehirlilik) kontrolu Aynı zamanda I.6.7 bölüme bakınız. II.2.6 Testin performansı Test boyunca, bilinen zaman aralıklarında tekrarlayarak, yeterince sıklıkla 10 günün başlangıcında ve 10 günün sonundaki yüzde uzaklaşmayı belirlemek için DOC konsantrasyonunu saptayın. Her belirleme için sadece minimum hacimde test süspansiyonu alın. Örneklemeden önce eğer gerekli ise seyreltme suyu ekleyerek iyi bir şekilde kayıplarını giderin. Örnek almadan önce kültür ortamını tamamen karıştırın ve örneklemeden önce kabın duvarlarına tutunmuş maddenin çözündüğünden veya çözelti içine geçtiğinden emin olun. Örnek alındıktan hemen sonra hemen süzme membranı kullanın veya santrifüjleyin. Süzülmüş veya santrifüjlenmiş örneği aynı gün analiz edin, aksi takdirde 2-4 °C’ de maksimum 48 saat depolayın, uzun süreli saklamalar için -18 °C veya daha düşük sıcaklıklarda depolayın. II.3 Veriler ve raporlama II.3.1 Sonuçların işlenmesi t zamanındaki bozunma yüzdesini, I.7.1 (DOC’ un belirlenmesi) ve isteğe bağlı olarak I.7.2 de verildiği gibi hesaplayın. Sağlanan veri formuna sonuçları kaydedin. II.3.2 Sonuçların geçerliliği Bakınız I.5.2 II.3.3 Raporlama Bakınız I.8 II.4 Veri formu Veri formunun bir örneği aşağıda verilmektedir. DOC DIE-AWAY TESTİ
İsim: Stok çözelti konsantrayonu: kimyasal olarak mg/ml Ortamdaki ilk konsantrasyon: kimyasal olarak mg/ml
Kaynak: Yapılan işlemler: Varsa ön şartlandırma: reaksiyon karışımındaki askıda katı maddelerin konsantrasyonu: mg/l
Karbon analiz cihazı:
(*) Eğer dikkate alınacak kadar fark varsa D1 ve D2 ortalaması alınmamalıdır. Not: Referans kimyasal ve toksisite kontrolleri çin benzer formatlar kullanılabilir
BÖLÜM III. DEĞİŞTİRİLMİŞ OECD TARAMA TESTİ (Yöntem C.4-B) III.1 Test yönteminin ilkesi Test maddesinden (10-40 mg DOC/litre) bilinen miktarlarda içeren, hacmi ölçülmüş mineral ortamı nominal tek organik karbon kaynağı olarak 1 litre ortam hacmi başına 0,5 ml atıksu ile aşılanır. Karışım 22±2 °C de dağıtılmış ışık altında veya karanlıkta havalandırılır. Bozunma, 28 günlük sürede, sık aralıklarla DOC analizi ile takip edilir. Biyolojik bozunma derecesi, uzaklaştırılan DOC konsantrasyonun (kör aşı için düzeltilen) ilk başta bulunan konsantrasyondaki yüzde oranı olarak ifade edilir. Esas biyolojik bozunma derecesi inkübasyonun başında ve sonunda yapılan tamamlayıcı kimyasal analizden de hesaplanabilir. III.2 Test yönteminin tanımlanması III.2.1 Düzenek
III.2.2 Mineral ortamının hazırlanması Stok çözeltilerinin hazırlanması için, bakınız I.6.2 10 ml (a) çözeltisini 80 ml seyreltme suyuyla karıştır, (b) çözeltisinden 1 ml (d) çözeltisine ekle ve seyreltme suyuyla 1 litreye tamamla. Bu metod aşı olarak sadece 0,5 ml atıksu/litre kullanır ve buyüzden ortam eser elementlerle ve büyüme faktörleri ile güçlendirilmeye ihtiyaç duyabilir. Bu işlem son ortama aşağıdaki çözeltilerin herbirinden 1 ml eklenmesi ile yapılır: Eser element çözeltisi: Manganez sülfat tetrahidrat, MnSO4.4H2O 39,9 mg Borik asit, H3BO3 57,2 mg Çinko sülfat heptahidrat, ZnSO4.7H2O 42,8 mg Amonyum heptamolibdat (NH4)6Mo7O24 34,7 mg Fe-şelat (FeCl3 etilendiamin-tetra-asetik asit) 100,0 mg çözün, seyreltme suyu içinde 1000 ml’ye tamamlayın.
Maya özütü 15.0 mg Maya özütünü 100 ml su içinde çözün. 0,2 mikronluk membranlardan geçirerek sterilize edin, veya taze olarak hazırlayın.
mineral ortamın litresi başına 0,5 ml kullanılır. III.2.4 Cam balonların hazırlanması Örnek olarak, mineral ortamının 800 ml’ lik kısmını 2 litrelik kaplara koyunuz ve test ve referans maddesinin stok çözeltilerinden yeterli hacimde konik cam balonlara, kimyasal konsantrasyonu 10-40 mg DOC/litreye eşdeğer olacak şekilde, farklı kaplara ekleyin. pH değerini kontrol edin, eğer gerekliyse 7,4’ e ayarlayın. Cam balonları kanalizasyon atık suyu ile 0,5 ml/litre olacak şekilde aşılayın (bakınız I.6.4.2). Ayrıca test ve referans kimyasalı içermeyen aşı kontrollerini mineral ortamda hazırlayın. Gerekli olduğu takdirde, mineral ortamda, hem test hem de referans kimyasalları bakımından karşılaştırılabilir konsantrasyonlar ihtiva eden bir çözelti aşılama yoluyla test kimyasallarının olası yavaşlatıcı (inhibe edici) etkisini kontrol etmek için bir kap kullanın. Aynı zamanda gerekli olduğu takdirde, bu test aşılanmamış çözeltisini kullanılarak abiyotik olarak bozunmaya uğrayıp uğramadığını kontrol etmek için başka steril cam balon kullanın.(I.6.6. bölüme bakınız) Buna ilaveten, test kimyasalının cam, atık su vb. tarafından kayda değer oranda adsorplandığından şüphe ediliyorsa, olası adsorpsiyon var olup olmadığını ve böylelikle kimyasal madde için testin uygunluğunu belirlemek için bir ön değerlendirme yapın (Tablo 1’e bakınız). Test maddesi, aşı ve sterilize edici madde ihtiva eden bir cam balon hazırlayın. Tüm cam balonlardaki hacimleri (miktarları) mineral ortamla birlikte 1 L yapınız ve karıştırdıktan sonra DOC’nin ilk konsantrasyonunu saptamak için her bir cam balondan örnekler alınız (Ek-II.4’e bakınız.) Cam balonların ağızlarını örneğin alüminyum folye ile cam balon ve çevreleyen atmosfer arasında serbest hava geçişine izin verecek şekilde kapatınız. Daha sonra testi başlatmak için kapları çalkalama düzeneğine yerleştiriniz. III.2.5 Tipik çalışmada cam balon numaraları Kap 1 ve 2: Test süspansiyonu Kap 3 ve 4: Kör aşı Kap 5: İşlem kontrolu
Kap 6 : Abiyotik steril kontrolu Kap 7: Adsorpsiyon kontrolu Kap 8: Toksisite (Zehirlilik) kontrolu Ayrıca bakınız1.6.7.
Sağlanan veri formlarına sonuçları kaydedin. III.3.2 Sonuçların geçerliliği Bakınız I.5.2 III.3.3 Raporlama Bakınız I.8 III.4 Veri formu Veri formunun bir örneği aşağıda verilmektedir. DOC DIE-AWAY TESTİ
İsim: Stok çözelti konsantrayonu: kimyasal olarak mg/ml Ortamdaki ilk konsantrasyon: kimyasal olarak mg/ml
Kaynak: Yapılan işlemler: Varsa ön şartlandırma: reaksiyon karışımındaki askıda katı maddelerin konsantrasyonu: mg/l
Karbon analiz cihazı:
Yüklə 5,29 Mb. Dostları ilə paylaş:
| |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
